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詳解奧林巴斯顯微鏡割斷法的觀察要點(diǎn)

更新時(shí)間:2017-09-05瀏覽:1099次

如果奧林巴斯顯微鏡樣品以苯乙烯樹脂做為包埋劑,再行割斷法做掃描電鏡觀察是十分方便的。因?yàn)楸揭蚁┚酆虾螅趸┘按姿岙愇焖岬群苋菀讓⑵淙芙猓啻胃鼡Q溶劑便可將苯乙烯清除干凈.因此,在制做透射電鏡標(biāo)本時(shí),多做出幾個(gè)包埋膠囊樣品,待聚合后,顯微鏡按上述方法割斷,奧林巴斯顯微鏡將割斷好的樣品放在氧化丙烯中,約2小時(shí)后便可經(jīng)醋酸異戊醋置換、臨界點(diǎn)干操。
奧林巴斯顯微鏡除樹脂割斷法外,尚有有機(jī)溶劑(酒精、醋酸異戊醋等)割斷法,顯微鏡水溶性包埋劑(二甲基亞礬、甘油等)割斷法及其它(冷凍、奴里昂等)割斷法,操作都很容易。再以酒精割斷法為例:樣品固定后用酒精脫水。當(dāng)脫水完成后,顯微鏡將樣品投入頂先裝有無水乙醉的膠囊中(避免出現(xiàn)氣泡)。顯微鏡將膠囊放在低溫裝里內(nèi)使乙醉固化.進(jìn)行樣品割斷。割斷的樣品立即進(jìn)入置于室溫的無水乙醉中,待乙醉融化后移入醋酸異戊酷、進(jìn)行臨界點(diǎn)干操。
需指出的是經(jīng)割斷法制備的標(biāo)本需要用高分辨率的顯微鏡(如場發(fā)射電子槍掃描電鏡)進(jìn)行觀察.一般的掃描電鏡分辨率低于透射電鏡,若用顯微鏡鏡割斷法觀察組織、細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu),以和透射電鏡圖相對(duì)比,必須用場發(fā)射電子槍掃描電鏡.由于顯微鏡立體感較強(qiáng),割斷樣品在鏡下顯現(xiàn)出高爾基扁平囊與大泡、小泡的空間分布,線粒體蠟像隔板一樣伸展;核搪體像小蘑菇一樣附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“板”上,該方法應(yīng)用不太廣泛。

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